防護口罩檢驗方法

B1產(chǎn)品采集與樣品處理

于同一批號的二個運輸包裝中至少抽取12個蕞小銷售包裝樣品，1/4樣品用于檢測，1/4樣品用于留樣，另1/2樣品（可就地封存）必要時用于復檢。抽樣的蕞小銷售包裝不應有破裂，檢驗前不得啟開。

在級凈化條件下用無菌方法打開用于檢測的至少3個包裝，從每個包裝中取樣，準確稱取±1g樣品。剪碎后加人到滅菌生理鹽水中，充分混勻，得到一個生理鹽水樣液。液體產(chǎn)品用原液直接做樣液。

如被檢樣品含有大量吸水樹脂材料而導致不能吸出足夠樣液時，稀釋液量可按每次遞增，直至能吸出足夠測試用樣液。在計算細菌菌落總數(shù)與真菌菌落總數(shù)時相應調整稀釋度。

B2細菌菌落總數(shù)與初始污染菌檢測方法

本方法適用于產(chǎn)品初始污染菌與細菌菌落總數(shù)（以下統(tǒng)稱為細菌菌落總數(shù)）檢測。

B2.1操作步驟

待上述生理鹽水樣液自然沉降后取上清液作菌落計數(shù)。共接種5個平皿，每個平皿中加人1ml樣液，然后用冷卻至45℃左右的熔化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基15～倒人每個平皿內混合均勻。待瓊脂凝固后翻轉平皿置35℃±2℃培養(yǎng)后，計算平板上的菌落數(shù)。

B2.2結果報告

菌落呈片狀生長的平板不宜采用；計數(shù)符合要求的平板上的菌落，按式（B1）計算結果：

X1=A×（K÷5）

式中X1—–細菌菌落總數(shù)cfu/g或cfu/mL；

A——5塊營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上的細菌菌落總數(shù)；

K——稀釋度。

當菌落數(shù)在以內，按實有數(shù)報告，大于時采用二位有效數(shù)字。

如果樣品菌落總數(shù)超過本標準的規(guī)定，按B2.3進行復檢和結果報告。

B2.3檢方法

將留存的復檢樣品依前法復測2次，2次結果平均值都達到本標準的規(guī)定，則判定被檢樣品合格；其中有任何1次結果平均值超過本標準規(guī)定，則判定被檢樣品不合格。

B3大腸菌群檢測方法

B3.1操作步驟

取樣液5ml接種，乳糖膽鹽發(fā)酵管，置35℃±2℃培養(yǎng)，如不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣，則報告為大腸菌群陰性。

如產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則劃線接種伊紅美藍瓊脂平板，置35℃±2℃培養(yǎng)18～，觀察平板上菌落形態(tài)。典型的大腸菌落為黑紫色或紅紫色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤，常具有金屬光澤，也有的呈紫黑色，不帶或略帶金屬光澤，或粉紅色，中心較深的菌落。

取疑似菌落1-2個作革蘭氏染色鏡檢，同時接種乳糖發(fā)醉管，置35℃±2℃培養(yǎng)，觀察產(chǎn)氣情況。

B3.2結果報告

凡乳糖膽鹽發(fā)酵骨產(chǎn)酸產(chǎn)氣，乳糖發(fā)酵管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，在伊紅美藍平板上有典型大腸菌落，革蘭氏染色為陰性無芽胞桿菌，可報告被檢樣品檢出大腸桿菌。

B4綠膿桿菌檢測方法

B4.1操作步驟

取樣液5ml，加人到SCDLP培養(yǎng)液中，充分混勻，置35℃±2℃培養(yǎng)18～。如有綠膿桿菌生長，培養(yǎng)液農面呈現(xiàn)一層薄菌膜，培養(yǎng)液常呈黃綠色或藍綠色。從培養(yǎng)液的薄菌膜處挑取培養(yǎng)物，劃線接種十六烷三甲基溴化胺瓊脂平板，置35℃±2℃培養(yǎng)18～，觀察菌落特征。綠膿桿菌在此培養(yǎng)基上生長良好，菌落扁平，邊緣不整，菌落周圍培養(yǎng)基略帶粉紅色，其他菌不長。

取可疑菌落涂片作革蘭氏染色，鏡檢為革蘭氏陰性菌者應進行下列試驗：

氧化酶試驗：取一小塊潔凈的白色濾紙片放在滅菌平皿內，用無菌玻棒挑取可疑菌落涂在濾紙片上，然后在其上滴加一滴新配制的1%二甲基對苯二胺試液，內出現(xiàn)粉紅色或紫紅色，為氧化酶試驗陽性，不變色者為陰性。

綠膿菌素試驗：取2-3個可疑菌落，分別接種在綠膿菌素測定用培養(yǎng)基斜面，35℃±2℃培養(yǎng)，加入3～5ml，充分振蕩使培養(yǎng)物中可能存在的綠膿菌素溶解，待三-氯-甲-烷呈藍色時，用吸管移到另一試管中并加人1mol/L的鹽酸1mL，振蕩后靜置片刻。如上層出現(xiàn)粉紅色或紫紅色即為陽性，表示有綠膿菌素存在。