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PIPES(哌嗪N,N`二(2 乙磺酸))是一種兩性緩沖液,緩沖PH范圍在 7.2 - 7.4,不溶于水,但可溶于氫氧化鈉水溶液。 PIPES包含在Good’s緩沖液中,廣泛應(yīng)用于疫苗生產(chǎn),組織培養(yǎng)、陽(yáng)離子功效的研究、以及生物物質(zhì)的分離技術(shù)等方面。
PIPES緩沖劑的基本介紹
PIPES與其它緩沖劑不同,例如:BIS-TRIS、BICINE,它和很多金屬離子無(wú)法形成穩(wěn)定的化合物,所以非常適用于作為金屬離子溶液中的緩沖劑。
PIPES的pKa值有兩個(gè),分別為1pKa和2.67pKa,1pKa在環(huán)境溫度處于25°C下為6.76,接近生理pH,緩沖范圍在6.1-7.5,這就適用于細(xì)胞培養(yǎng)工作,2.67pKa在25°C下,緩沖范圍為1.5-3.5。
PIPES可以應(yīng)用在哪里
PIPES可應(yīng)用于磷酸纖維素色譜純化微管蛋白以及凝膠過(guò)濾法純化重組GTP,結(jié)合蛋白ARF1和ARF2,作為緩沖液從大腸桿菌中結(jié)晶轉(zhuǎn)酮酶。不過(guò)值得注意的是,由于PIPES可以形成自由基,并不適用于氧化還原體系。
PIPES緩沖劑的優(yōu)勢(shì)
1、動(dòng)植物組織樣品的戊二醛固定可導(dǎo)致脂質(zhì)損失,有明顯的形態(tài)變化,當(dāng)使用PIPES緩沖戊二醛固定劑時(shí),脂質(zhì)損失和偽影**小化。
2、如果固定在伴草酸鹽緩沖的戊二醛中進(jìn)行超細(xì)胞化學(xué)固定時(shí),有可能會(huì)選擇性地喪失了堿性磷酸酶的活性。當(dāng)使用PIPES作為緩沖液時(shí),活性保留率會(huì)有明顯提高。
3、戊二醛和甲醛在PIPES緩沖液中結(jié)合,熒光顯微鏡和電子顯微鏡的真菌游動(dòng)孢子的固定能達(dá)到極佳。
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